勁馬講述酶標板的度及線性標準
　　
　　上海勁馬在免疫學檢測中，酶標板的檢測性和保證酶標板性的濃度范圍，是決定使用哪種酶標板品牌的非常重要因素。本實驗采用商業(yè)化的ELISA實驗方法來分析比較11種不同品牌的酶標板的性和線性范圍。實驗證明在所有測試的酶標板中，NuncMaxiSorp酶標板具有zui廣的線性范圍（4-2000pg待測蛋白/mL）。MaxiSorp酶標板也顯示出了良好的重復性，另外100%的MaxiSorp酶標板的R2超過0.99，因此它在所有測試的不同品牌的酶標板中具有zui的結果。
　　
　　縮寫B(tài)SA：牛血清白蛋白ELISA：酶聯(lián)免疫吸附測定HRP：辣根過氧化物酶O.D.：吸光值PBS：磷酸鹽緩沖液TNF-alpha：人腫瘤壞死因子a
　　
　　在定量實驗中例如酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA），不僅了解待測試劑的zui小濃度是非常重要的，而且酶標板的性及保持測試性的濃度范圍也同樣重要。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）中常使用一次性多孔板，而聚苯乙烯板的特性可能改變試劑與固象部分的結合方式。這也反過來影響酶標板在不同反應物濃度時的性。保證酶標板準確度的濃度范圍（線性范圍）和線性曲線的重復性，是客戶選擇酶標板品牌著重考慮的因素。下面的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）實驗中，我們考察了NuncMaxisorp和其它競爭品牌酶標板的準確性和線性范圍。
　　
　　實驗方法用商業(yè)化ELISA試劑盒中的稀釋液來準備包被試劑：將0.1ml的捕獲抗體溶液（稀釋至4μg/mL）加入酶標板的每孔中，密封酶標板，室溫下放置過夜。重復洗酶標板3次，每個孔中加入0.3mL封閉液（10g/L溶于PBS的牛血清白蛋白溶液），撫育一小時，重復上述沖洗步驟。用稀釋液將人腫瘤壞死因子a以1：2梯度稀釋，濃度從2000pg/mL到2pg/mL。靈敏度測試用來考察每個品牌的zui小可檢測濃度。人腫瘤壞死因子a濃度。加0.1mL的人腫瘤壞死因子a至每個孔中，室溫下?lián)嵊?小時。重復上述沖洗步驟，加0.1mL抗體（稀釋到250ng/mL）至每個孔中，室溫下?lián)嵊?小時。重復上述沖洗步驟，加入0.1mL的辣根過氧化酶-鏈霉親和素溶液（1:200稀釋）至每孔中，室溫下?lián)嵊?0分鐘。經(jīng)過zui后一次沖洗后，每孔加入0.1mL的顯色劑，反應20分鐘后立即加入0.05mL的終止液。要控制顯色反應時間，以保持每個酶標板的一致性。用分光光度計讀取每塊酶標板在波長492nm下的吸光值，間隔5nm，100ms延時，300ms測試時間。檢測閾值的計算方式為整板的空白孔（不加人腫瘤壞死因子a）的平均OD值加上兩倍的標準偏差。以檢測到超過閾值吸光度所對應的zui小抗原濃度來評價酶標板的靈敏度。通過線性范圍測定來確定每塊微孔板保持測量性的濃度范圍。按以上步驟進行實驗，所用的酶標板檢測結果如表3所示，每一縱欄的吸光值（吸光值=測得的吸光值-空白孔吸光值），取重復孔平均值作為每板的數(shù)值。用Excel制作對數(shù)坐標的劑量-效應曲線，并計算出的R2，以此來評價每塊板的線性結果。